緩沖液參考中心

 

緩沖液參考中心

• 常見生物緩沖液的pH范圍

• Tris緩沖液的制備 - pH vs. 溫度

• 磷酸鹽緩沖液的制備 - 0.2M溶液

• 檸檬酸 - 磷酸氫二鈉緩沖液的配置，pH2.6 - 7.6

• 檸檬酸 - 檸檬酸鈉緩沖液的配置，pH3.0 - 6.2

• 乙酸鈉 - 醋酸緩沖液的配置，pH3.7 - 5.6

• 磷酸氫二鈉 - 磷酸二氫鈉緩沖液的配置，pH5.8 - 8.0 （25℃）

• 咪唑 - 鹽酸鹽緩沖液的配置，pH6.2 - 7.8 （25℃）

• 碳酸鈉 - 碳酸氫鈉緩沖液的配置，pH6.2 - 7.8 （25℃）

• 緩沖液配置公式

 

選擇正確的緩沖液

基于酸堿性、解離常數（衡量溶液酸堿性、濃度以及溫度的系數）、規格、純度以及精確的應用領域可幫助您選擇一款合適的緩沖液。以下表格通過pH與pKa數據的參考，為您提供一些常用緩沖液的配置方案。

 

緩沖液級別

為滿足各種形式的實驗需求，我們提供不同純度與雜質含量的緩沖液試劑。目前有7種不同級別的試劑可以滿足基本的實驗室需求、幫助建立藥品配方與生產、檢測痕量金屬含量以及生產指定純度級別的材料。

 

常用生物緩沖的有效pH范圍（25℃, 0.1M)

 

名稱 有效的pH緩沖范圍 pKa（20℃） pKa（25℃） pKa（37℃） 試劑級 更優級別 MES 5.5-6.7 6.16 6.1 5.97 M105074 M274288 Bis-Tris 5.8-7.2 n/a 6.5 6.36 B105639 B113072 ADA 6.0-7.2 6.65 6.59 6.46 A108964 A108965 ACES 6.1-7.5 6.88 6.78 6.54 A100327 A100328 PIPES 6.1-7.5 6.8 6.76 6.66 P105090 P105092 P105093 P105091 MOPSO 6.2-7.6 n/a 6.9 6.75 M113008 n/a Bis-Tris-Propane 6.3-9.5 n/a 6.8，9.0 n/a B299299 n/a B105640 BES 6.4-7.8 7.17 7.09 6.9 B105116 B105117 B105115 MOPS 6.5-7.9 7.28 7.2 7.02 M105135 M274252 M105133 TES 6.8-9.2 7.5 7.4 7.16 T105113 T105114 HEPES 6.8-8.2 7.55 7.48 7.31 H109407 H109408 H109406 DIPSO 7.0-8.2 n/a 7.6 7.35 B113022 n/a MOBS 6.9-8.3 n/a 7.6 n/a M120630 n/a TAPSO 7.0-8.2 n/a 7.6 7.39 T113029 n/a Tris 7.0-9.0 8.2 8.06 7.72 T110600 T110602 T110599 T110598 T274227 T274250 T110601 HEPPSO 7.1-8.5 n/a 7.8 6.66 H113003 n/a POPSO 7.2-8.5 n/a 7.8 7.63 P105272 n/a TEA 7.3-8.3 n/a 7.8 n/a T108151 n/a T108154 EPPS 7.3-8.7 n/a 8 n/a H110899 H110901 H110900 Tricine 7.4-8.8 8.16 8.05 7.8 T100351 T118067 T100350 Gly-gGly 7.5-8.9 n/a 8.2 n/a G105429 G119491 G119492 G119491 Bicine 7.6-9.0 8.35 8.26 8.04 B110905 B110906 HEPBS 7.6-9.0 n/a 8.3 n/a H113002 n/a TAPS 7.7-9.1 8.49 8.4 8.18 T108961 T108963 T108962 AMPD 7.8-9.7 n/a 8.8 n/a A106026 n/a TABS 8.2-9.6 n/a 8.9 n/a T329718 n/a AMPSO 8.3-9.7 n/a 9 9.1 A120640 n/a CHES 8.6-10.0 9.55 9.49 9.36 C110897 n/a C110898 CAPSO 8.9-10.3 n/a 9.6 9.43 C105213 n/a AMP 9.0-10.5 n/a 9.7 n/a A140833 n/a A100592 CAPS 9.7-11.1 10.56 10.4 10.02 C105209 n/a C105210 CABS 10.0-11.4 n/a 10.7 n/a C120628 n/a

 

TRIS緩沖液配置指導 - pH vs.溫度

 

pH 在不同溫度下的變化     g/L  0.5M溶液   5℃ 25℃ 37℃ Tris-HCl Tris base 7.76 7.2 6.91 7.02 0.67 7.89 7.3 7.02 6.85 0.8 7.97 7.4 7.12 6.61 0.97 8.07 7.5 7.22 6.35 1.18 8.18 7.6 7.3 6.06 1.39 8.26 7.7 7.4 5.72 1.66 8.37 7.8 7.52 5.32 1.97 8.48 7.9 7.62 4.88 2.3 8.58 8 7.71 4.44 2.65 8.68 8.1 7.8 4.02 2.97 8.78 8.2 7.91 3.54 3.34 8.88 8.3 8.01 3.07 3.7 8.98 8.4 8.1 2.64 4.03 9.09 8.5 8.22 2.21 4.36 9.18 8.6 8.31 1.83 4.65 9.28 8.7 8.42 1.5 4.9 9.36 8.8 8.51 1.23 5.13 9.47 8.9 8.62 0.96 5.32 9.56 9 8.7 0.76 5.47

 

磷酸鹽緩沖液配置指導 - 0.2M 溶液

 

磷酸二氫鉀無水物 g/L 磷酸氫二鈉七水合物 23℃ pH 磷酸二氫鉀無水物 g/L 磷酸氫二鈉七水合物 23℃ pH 22.4 3.49 5.7 10.8 29.51 6.9 22.08 4.29 5.8 9.36 32.73 7 21.6 5.37 5.9 7.92 35.95 7.1 21.05 6.6 6 6.72 38.63 7.2 20.4 8.05 6.1 5.52 41.31 7.3 19.56 9.93 6.2 4.56 43.46 7.4 18.6 12.07 6.3 3.84 45.07 7.5 17.64 14.22 6.4 3.12 46.68 7.6 16.44 16.9 6.5 2.52 48.55 7.7 15 20.12 6.6 2.04 49.09 7.8 13.56 23.34 6.7 1.68 49.89 7.9 12.24 26.29 6.8 1.27 50.81 8

 

醋酸-磷酸氫二鈉緩沖液配置，pH 2.6-7.6

一水檸檬酸，C6H8O7 ? H2O，MW 210.14；0.1M 含量為21.01 g/L。磷酸氫二鈉，MW 141.98； 0.2M 含量為28.40 g/L，或者磷酸氫二鈉二水合物，MW 178.05；0.2M 含量為35.61 g/L。

 

當X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.2M-磷酸氫二鈉混合時

 

pH X mL 0.1M-醋酸 Y mL 0.2M-碳酸氫二鈉 2.6 89.1 10.9 2.8 84.15 15.85 3 79.45 20.55 3.2 75.3 24.7 3.4 71.5 28.5 3.6 67.8 32.2 3.8 64.5 35.5 4 61.45 38.55 4.2 58.6 41.4 4.4 55.9 44.1 4.6 53.25 46.75 4.8 50.7 49.3 5 48.5 51.5 5.2 46.4 53.6 5.4 44.25 55.75 5.6 42 58 5.8 39.55 60.45 6 36.85 63.15 6.2 33.9 66.1 6.4 30.75 69.25 6.6 27.25 72.75 6.8 22.75 77.25 7 17.65 82.35 7.2 13.05 86.95 7.4 9.15 90.85 7.6 6.35 93.65

 

醋酸-檸檬酸鈉緩沖液配置，PH 3.0-6.2

一水檸檬酸，C6H8O7 ? H2O，MW 210.14；0.1M 含量為21.01 g/L。檸檬酸三鈉二水合物，C6H5O7Na3?2H2O，MW 294.12；0.1M 含量為29.41 g/L。 

 

當X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.1M-檸檬酸三鈉混合時

 

pH X mL 0.1M-醋酸 Y mL 0.1M-檸檬酸三鈉 3 82 18 3.2 77.5 22.5 3.4 73 27 3.6 68.5 31.5 3.8 63.5 36.5 4 59 41 4.2 54 46 4.4 49.5 50.5 4.6 44.5 55.5 4.8 40 60 5 35 65 5.2 30.5 69.5 5.4 25.5 74.5 5.6 21 79 5.8 16 84 6 11.5 88.5 6.2 8 92

 

醋酸鈉-醋酸緩沖液配置，PH 3.7 - 5.6

醋酸鈉，CH3COONa ? 3H2O，MW 136.09；0.2M 含量為27.22 g/L。

 

X mL 0.2M-NaOAc 和Y mL 0.2M-HOAc 混合時

 

 

 

pH，18℃ X mL 0.2M-醋酸鈉 Y mL 0.2M-冰醋酸 3.7 10 90 3.8 12 88 4 18 82 4.2 26.5 73.5 4.4 37 63 4.6 49 51 4.8 59 41 5 70 30 5.2 79 21 5.4 86 14 5.6 91 9

 

碳酸氫二鈉-碳酸二氫鈉緩沖液配置，PH 5.8-8.0  25℃

Na2HPO4 ? 2H2O, MW 178.05；0.2M 含量為35.61 g/L。Na2HPO4 ? 12H2O，MW 358.22； 0.2M 含量為71.64 g/L。NaH2PO4 ? H2O，MW 138.01；0.2M 含量為27.6 g/L。NaH2PO4 ? 2H2O，MW 156.03；0.2M 含量為31.21 g/L。 

 

X mL 0.2M-磷酸氫二鈉，Y mL 0.2M-磷酸二氫鈉；用水稀釋至100mL

 

pH，25℃ X mL 0.2M-磷酸氫二鈉 Y mL 0.2M-磷酸二氫鈉 5.8 4 46 6 6.15 43.85 6.2 9.25 40.75 6.4 13.25 36.75 6.6 18.75 31.25 6.8 24.5 25.5 7 30.5 19.5 7.2 36 14 7.4 40.5 9.5 7.6 43.5 6.5 7.8 45.75 4.25 8 47.35 2.65

 

咪唑-HCl 緩沖液配置，PH 6.2 - 7.8  25℃

咪唑，C3H4N2，MW 68.08

 

25mL 0.2M-咪唑（13.62 g/L），X mL 0.2M-HCl，用水稀釋至100mL

 

pH, 25℃ X mL 0.2M-HCl 6.2 21.45 6.4 19.9 6.6 17.75 6.8 15.2 7 12.15 7.2 9.3 7.4 6.8 7.6 4.65 7.8 3

 

碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液配置，PH 9.2 -10.8

Na2CO3 ? 10H2O，MW 286.2；0.1M 含量為28.62 g/L。NaHCO3， MW 84.0；0.1M 含量為8.40 g/L。

 

X mL 0.1M-碳酸鈉和Y mL 0.1M-碳酸氫鈉混合時

 

20℃ 37℃ X mL 0.1M-碳酸鈉 Y mL 0.1M-碳酸氫鈉 9.2 8.8 9.4 9.1 9.5 9.4 9.8 9.5 9.9 9.7 10.1 9.9 10.3 10.1 10.5 10.3 10.8 10.6

 

緩沖液制備的配方與方式

質量分數（w/v)

（緩沖液所需百分比/100）× 最終緩沖液體積（mL）=  最初所需原料的質量（g）

 

配置摩爾濃度

所需的物質的量濃度 × 分子量 × 溶液最終體積（L) = 所需的質量（g）

 

亨德森-哈塞爾巴爾赫方程